植物组织培养的过程？

最近有好多新手朋友在咨询一些关于植物组织培养的问题。有的朋友反映由于没有相关的知识背景，理解起来感觉有些吃力。因此为了能让圈外人士也能对植物组织培养有所了解。从今天起我将不定期的写一些关于植物组培基础知识的相关文章，希望对大家有所帮助。本文为科普类小文，专业人士可绕过。什么是植物组织培养？年，英国科学家Steward等用胡萝卜根的愈伤组织细胞进行悬浮培养，成功诱导出胚状体并分化为完整的小植株。植物组织培养英文名为，是将植物上的器官、组织或细胞切割下来。在人工配置的营养基质（又称培养基）上进行无菌培养，同时通过控制培养基成分及温度、光照等其它环境因素，使培养物定向地生长、分化至发育形成完整植株的过程。植物组织为何能培养？由德国植物学家在年提出的植物细胞全能性（）理论是植物组织培养的理论依据。细胞全能性理论认为植物的每个细胞都包含着该物种的全部遗传信息，从而具备发育成完整植株的遗传能力。在适宜条件下，任何一个细胞都可以发育成一个新个体。植物组织培养有什么用途？1、快速繁殖运用组织培养的途径，一个单株一年可以繁殖几万到几百万个植株。可以对目标植物进行快速大量的繁殖。例如一株葡萄苗理论上一年可以繁殖到几十万株。2、种苗脱毒针对病毒对农作物造成的严重危害，通过组织培养可以有效地培育出大量的无病毒种苗。目前马铃薯、甘薯、草莓、香蕉、葡萄等品种主要就是通过植物组织培养的方法进行脱毒苗的繁育。3、远缘杂交利用组织培养可以使难度很大的远缘杂交取得成功，从而育成一些罕见的新物种。4、突变育种采用组织培养可以直接诱变和筛选出具抗病、抗盐、高赖氨酸、高蛋白等优良性状的品种。5、基因工程基因工程主要研究DNA的转导，而基因转导后必须通过组织培养途径才能实现植株再生。6、生物制品有些极其昂贵的生物制品，如抗癌首选药物紫杉醇等，可以用大规模培养植物细胞来直接生产。近年国内在红豆杉组织培养中获得生长量高达0.49gFW/（gFW·d）的细胞系，每升细胞培养物中紫杉醇的产量可达0.25mg。

植物组织培养的流程

第一步，将采来的植物材料除去不用的部分，将需要的部分仔细洗干净，如用适当的刷子等刷洗。把材料切割成适当大小，即灭菌容器能放入为宜。置自来水龙头下流水冲洗几分钟至数小时，冲洗时间视材料清洁程度而宜。易漂浮或细小的材料，可装入纱布袋内冲洗。

流水冲洗在污染严重时特别有用。洗时可加入洗衣粉清洗，然后再用自来水冲净洗衣粉水。洗衣粉可除去轻度附着在植物表面的污物，除去脂质性的物质，便于灭菌液的直接接触。当然，最理想的清洗物质是表面活性物质—吐温。

第二步是对材料的表面浸润灭菌。要在超净台或接种箱内完成，准备好消毒的烧杯、玻璃棒、7的吐温20或80（一种湿润剂），可以降低植物材料表面的张力，达到更好的消毒效果。

培养材料采集

要根据培养目的适当选取材料，选择原则易于诱导、带菌少。要选取植物组织内部无菌的材料。这一方面要从健壮的植株上取材料，不要取有伤口的或有病虫的材料。另一方面要在晴天，最好是中午或下午取材料，决不要在雨天、阴天或露水未干时取材料。因为健壮的植株和晴天光合作用、呼吸作用旺盛的组织，有自身消毒作用，这种组织一般是无菌的。

培养材料的消毒

从外界或室内选取的植物材料，都不同程度地带有各种微生物。这些污染源一旦带入培养基，便会造成培养基污染。因此，植物材料必须经严格的表面灭菌处理，再经无菌操作手续接到培养基上。

植物组织培养_

植物细胞组织培养一．实验目的植物细胞和组织培养的技术性强，要求无菌操作，通过本实验可初步掌握常规的组织培养技术，加深对无菌操作的了解。二．实验原理植物的全能性植物体的任何一个细胞都具有生长分化成为一个完整植株的能力，称为植物的全能性。植物组织培养就是利用植物的全能性进行离体无菌植物培养的一门技术。植物组织培养按其原始意义，就是指愈伤组织培养。但发展至今，其范围日益扩大，已包括植物和它的离体器官、组织、细胞和原生质体的离体无菌培养。因此，拥有几种不同水平的培养技术，即整体的、器官的、组织的、细胞的和原生质的培养技术。它们的涵义是1．植株培养。指以具备完整植株形态的材料（如幼苗和较大的植株）外植体的无菌培养。2．胚胎培养。指以从胚珠中分离出来的成熟或未成熟胚为外植体的离体无菌培养。3．器官培养。指以植物的根，茎，叶，花，果等器官为外植体的离体无菌培养，如根的根尖和切段，茎的茎尖，茎节和切段，叶的叶原基，叶片，叶柄，叶鞘和子叶，花器的花瓣，雄蕊（花药，花丝），胚珠，子房，果实等的离体无菌培养。4．组织培养。指以分离出植物各部位的组织（如分生组织，形成层，木质部，韧皮部，表皮，皮层，胚乳组织，薄壁组织，髓部等），或已诱导的愈伤组织为外植体的离体无菌培养。这是狭义的组织培养。5．细胞培养。指以单个的游离细胞（如用果酸酶从组织中分离的体细胞，或花粉细胞，卵细胞）为接种体的离体无菌培养。6．原生质体培养。指以除去细胞壁的原生质体为外植体的离体无菌培养。本实验选择烟草和豌豆为材料，烟草（Nicotiana）属茄科植物，是重要的工业原料，也是植物组织培养的四大典型实验植物（烟草、矮牵牛、胡萝卜、芸苔）中重要的一种，它的研究的最为广泛，也始终领先于其他的植物材料，目前，66个烟草品种中，再生成植株的有16个种，通过花药培养再生成花粉植株的有12个种，通过原生质体培养再生成植株的有2的酒精中1分钟，再浸入饱和次氯酸钠溶液中消毒15分钟，（此步以后要求无菌）用无菌水中冲洗5次，在灭菌的滤纸上吸干水分，放入灭菌的培养皿中。⑵在双目解剖镜下，用灭菌的解剖针剥去幼叶露出生长锥，用灭菌的解剖针挑取带着两至三个叶原基的生长锥。⑶将挑好的茎尖移到MS 10.7μmol/L萘乙酸(NAA) 4.4μmol/L6苄基腺嘌呤（6BA）的培养基上诱导愈伤组织形成，用封口膜将培养皿封好。[4]在恒温培养箱中，26℃下,培养六周，形成愈伤组织，经继代后，可用于生根培养。

进行植物组织培养时，把多余部分去除，植株表面洗净，分成小株，切口处用多菌灵消毒，之后用纱布包好。容器进行消毒处理，植株消毒时要在接种箱里进行，浸泡在酒精中10-30s，表面湿润后捞出接种到培养基中，在培养室培养保证器官形成。当形成球茎和芽时要进行切割，进行继代培养，并添加生长素来促使其生根发芽。